Dr. John Michael "J.D." Dorian

J.D. ist die Hauptfigur und Erzähler in einer Person, ist ein junger, talentierter, aber auch leicht tollpatschiger und infantiler Internist aus Ohio, dessen Gedanken und Tagträume dem Zuschauer fast nie verborgen bleiben. Während seiner Zeit am Sacred Heart hat er verschiedene Beziehungen und wird nach seiner Ausbildung als Arzt übernommen. Zusammen mit Kim Briggs bekommt er in der siebten Staffel einen Sohn, woraufhin er sich am Ende der achten Staffel dazu entschließt, einen neuen Job an einem anderen Krankenhaus anzunehmen, um näher bei seinem Sohn sein zu können. Daher verlässt er zum Ende der achten Staffel das Sacred Heart. Zuvor war er erneut mit seiner großen Liebe Elliott Reid zusammengekommen und in eine gemeinsame Wohnung gezogen.

Dr. Eliot Reid

Sie ist J. D.s ehrgeizige Kollegin aus Connecticut, praktiziert ebenfalls innere Medizin, tritt bevorzugt in jedes Fettnäpfchen, das sich ihr bietet, und hat fast im Jahrestakt Gefühlswallungen für J. D. Ab der sechsten Staffel arbeitet sie als Belegarzt einer Privatpraxis innerhalb des Krankenhauses. Im Verlauf der Serie entwickelt sich zwischen ihr und Carla eine feste Freundschaft. Zu Beginn der achten Staffel kommt sie erneut mit J.D. zusammen und zieht zum Ende der Staffel zu ihm in seine neue Wohnung.

Dr. Christopher Duncan Turk

Turk wird meist nur mit dem Nachnamen angesprochen, während Dr. Kelso ihn Turkleton nennt. Er ist ein begabter, selbstbewusster Chirurg und J. D.s bester Freund seit College-Tagen. Wegen seines Diabetes vermeidet er seit der vierten Staffel Süßes. Er ist mit der Krankenschwester Carla Espinosa liiert und seit der letzten Folge der dritten Staffel mit ihr verheiratet sowie seit der sechsten Staffel Vater. Gegen Ende der achten Staffel (8.16) wird er zum Chef der Chirurgie befördert.

Carla Espinosa

Krankenschwester; emotionaler Rückhalt der männlichen Hauptdarsteller, stets beratend und beeinflussend, Turks feste Freundin seit den ersten Folgen (später seine Frau), teilt lieber aus, als dass sie einsteckt. Sie hat mit Turk seit der sechsten Staffel eine Tochter namens Isabella. Sie ist Dominikanerin und stolz auf ihre Herkunft. Zu Beginn der achten Staffel wird Carla erneut schwanger.

Dr. Percival Ulysses "Perry" Cox

Cox ist ein erfahrener und verdienter Stationsarzt, der gerne ausgefeilte Monologe hält, ist J. D.s direkter Vorgesetzter und Mentor mit einer harten Schale und einem weichen Kern. Cox wirkt zwar meist äußerst verbittert und sarkastisch, zuweilen gar narzisstisch oder zynisch, dennoch ist er trotz allem ein äußerst fähiger und couragierter Arzt und somit Mentor und Vorbild für J. D. Bei guter Laune nennt er J. D. „Flachzange“ (Newbie im Original), im Regelfall gibt er ihm jedoch diverse Mädchennamen. Elliot wird von ihm Barbie, Turk Ghandigenannt.

Dr. Robert "Bob" Kelso

der gefürchtete Chefarzt des Sacred Heart, wird als eine Person vorgestellt, die stets zuerst ans Krankenhaus und an sich denkt. Er hat mehrere feste Angewohnheiten, wie an bestimmten Tageszeiten an bestimmten Orten zu verweilen oder bestimmte Tagesabläufe zu pflegen, welche er in einigen Folgen andeutet.

 Außerdem spricht er oft abfällig über seinen homosexuellen Sohn Harrison und dessen extravagantes Leben sowie über seine stark übergewichtige Ehefrau Enid, die jedoch beide nie in der Serie in Erscheinung treten.

In der siebten Staffel wird auf einer Überraschungsfeier sein tatsächliches Alter, nämlich 65 Jahre, bekannt. Der Vorstand desSacred Heart Hospitals will daraufhin die Pensionierung Kelsos durchsetzen. In Folge 9 der siebten Staffel verlässt Kelso schließlich freiwillig das Sacred Heart, obwohl von der Belegschaft für sein Bleiben gekämpft wurde. Trotzdem ist Dr. Kelso während der achten Staffel täglich im Krankenhaus, nachdem er bei einem Wettbewerb lebenslang kostenlose Muffins dort gewonnen hat.

Der Hausmeister

Der Hausmeister macht J. D. tagtäglich das Leben schwer, seit dieser mit seiner Vermutung recht behielt, dass eine automatische Schiebetür am Eingang des Krankenhauses aufgrund einer verklemmten Münze defekt sein könnte, was, wie der Hausmeister ihm vorhält, nur der Verursacher gewusst haben kann. In Folge 24 der ersten Staffel steckt der Hausmeister selbst einen Penny in die Tür, um unsichere Neulinge einzuschüchtern. Im Serienfinale gesteht J. D. dem Hausmeister, er habe damals aus Versehen einen Penny in die Tür fallen lassen. Der Hausmeister erscheint äußerst intelligent und gebildet, zuweilen auch in gewisser Hinsicht verrückt und menschenverachtend. Im Laufe der Serie behauptet er verschiedenste Details über seinen Hintergrund, etwa an der Harvard University studiert zu haben. Als sicher gilt nur, dass er Schauspieler und in jungen Jahren Hürdenläufer war. In der dritten Staffel (3.08: Meine Kollegin) findet J. D. heraus, dass der Hausmeister in Auf der Flucht mitgespielt hat.